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蛋白定量产品

名称:蛋白定量产品
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Bradford Protein Assay Kit, 5×
货号
产品规格

E161-01
100 ml

Bradford蛋白质定量试剂盒系根据Bradford染料结合原理,利用考马斯亮蓝G-250染料可与蛋白质结合(主要结合碱性或芳香族氨基酸残基),形成蓝色复合物的特性,通过测定样品在595 nm波长下的吸光值,并同BSA标准品所绘制的定量标准曲线做比对,即可计算出待测样品的蛋白质浓度。该方法可测定分子量在3000以上的多数蛋白和多肽浓度,具有灵敏度高、操作简便、快速、价格低廉等特点,是目前实验室最常用的蛋白质粗略定量方法。由于Bradford测定法会受样品中的一些试剂,特别是去垢剂的干扰(见下表),故使用时应先排除干扰因素。

用途

• 蛋白质定量
特点
• 灵敏度高:最低可检测出25 μg/ml,0.5 μg蛋白
• 简便快捷:只需一种试剂,10分钟内即可完成10~20个样品的检测
• 线性范围广:线性范围在100~1000 μg/ml
产品组分及保存条件
成分 总量 保存条件
5x Bradford Assay Reagent 100 ml(约500次标准法) 4℃或室温保存一年
BSA Standard(10 mg/ml) 2 ml -20℃保存一年;4℃保存6个月
样品中所含化学物质可接受浓度参考表

化学物质 可接受浓度* 化学物质 可接受浓度* 化学物质 可接受浓度*
β-mercaptoethanol 1 M SDS 0.1 % HEPES 0.1 M
DTT 5 mM Triton X-100 0.1 % Tris 2 M
NH4SO4 1 M Tween-20,60,80 0.015 % NaCl 5 M
MgCl2 1 M Urea 6 M KCl 1 M

*可接受浓度指的是Bradford试剂稀释前样品中的试剂浓度
注:表中所示为文献报道的数据,不排除上述试剂在可接受浓度内会对某些蛋白的测定产生影响。



BCA Protein Assay Kit
货号
产品规格

E162-01
100 ml

E162-05
500 ml


BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白浓度检测法是目前常用的蛋白质定量方法之一。BCA测定方法的原理与Lowry法相似,利用Cu2+在碱性条件下,可以被蛋白质还原成Cu+,Cu+与BCA试剂结合形成紫色的络合物的特性,通过测定样品在562 nm波长下的吸光值,并同蛋白标准曲线对比,即可计算出待测样品的蛋白浓度。BCA法与Lowry法相比,操作更为简便,稳定性更好。该方法还具有反应产物稳定、灵敏度高、线性范围广、对不同种类蛋白质检测的变异系数小、对去垢剂耐受性好等特点,特别适合于微量测定。

用途

• 蛋白质定量
特点
• 灵敏度高:最低可检测出25 μg/ml,0.5 μg蛋白
• 线性范围广:线性范围在25 ~2500 μg/ml
• 快速简便:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便
• 兼容性强:不受样品中去垢剂等化学物质的影响
• 稳定性好:蛋白间检测变异系数远小于Bradford法
产品组分及保存条件
成分 总量 保存条件
BCA Reagent A 100 ml(约100次标准法) 4℃或室温保存一年
BCA Reagent B 2 ml
BSA Standard(2 mg/ml) 1 ml -20℃保存一年
Bradford与BCA蛋白质定量试剂的性能比较


方法 Bradford BCA
比色杯法 96孔板法 比色杯法 96孔板法
标准测定法(高浓度)
蛋白样品体积 20 μl 10 μl 100 μl -
线性范围 100~1000 μg/ml 40~500 μg/ml 25 ~2500 μg/ml -
微量测定法(低浓度)
蛋白样品体积 800 μl 160 μl - 20 μl
线性范围 1~20 μg/ml 1~20 μg/ml - 5 ~250 μg/ml
最少温育时间(min) 5 5 30 30
测定波长(nm) 595 595 540~595 540~595
原理 Bradford(1976) Bradford(1976) Lowry(1951) Lowry(1951)