StarScript II Green Fast One-Step qRT-PCR Kit
本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行一步法实时荧光定量检测的专用试剂盒。本产品是基于高效的StarScript II 反转录酶、抗体型HotstartTaq DNA聚合酶配合优化的Buffer体系研制,在提高检测灵敏度的同时保证了扩增的特异性。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应时以提取的RNA为模板,在同一反应管内连续进行反转录和荧光定量检测,操作简单,并能有效防止污染。
本产品为2x预混增强荧光定量PCR反应体系,使用时只需加入模板、引物、ROX Reference Dye(用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,根据不同荧光定量PCR仪选择使用)和水,使其工作浓度为1×,即可进行反应。
【产品组分】
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组分名称 |
A323-01 |
A323-05 |
A323-10 |
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StarScript II One-Step Enzyme Mix |
220 ul |
220 ul*5 |
220 ul*10 |
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2×StarScript II One-Step qRT-PCR Buffer |
1.1 ml |
1.1 ml*5 |
1.1 ml*10 |
【保存条件】 -20℃恒温保存,有效期一年
【注意事项】
1. 实验过程中请注意避免RNase污染。
2. 除酶以外的各种试剂,使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果。
3. RNA模板的完整性对cDNA合成效率起着决定性作用,因此请选择可靠的RNA提取/纯化方法。建议使用GenStar TRIGene总RNA提取试剂 (货号P118-05)制备高质量的RNA模板。
4. 如果扩增片段较长或者RNA结构复杂,为了加强转录效果,可以将RNA单独置于65-70度加热5-10 min后再加入体系。
5. 制品只能使用特异性反转录引物,不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等进行反转录反应。
6. 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
7. 使用StarScript II One Step Enzyme Mix时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。-20℃保存,使用后立即放回冰箱。
StarScript II SYBR Two-Step qRT-PCR Synthesis Kit
本产品是专为两步法qRT-PCR实验设计的高灵敏度RT-PCR反应系统和高扩增效率的荧光定量PCR检测试剂盒。该反转录系统可以从极低量的总RNA或poly(A) mRNA合成第一链cDNA,无需额外添加RNase抑制剂,合成的cDNA产量更高,长度可达15 kb。2×RealStar SYBR Mixture 中的HotStart Taq DNA Polymerase高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq 酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的TaqPolymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性,所含的SYBR Green I荧光染料可以与所有的DNA双链相结合,使该产品可以用于多种不同靶序列的检测。同时,该产品具有高特异性和高灵敏度的特点,即使极低丰度的基因也能得到有效扩增。
【产品组分】
| 组分名称 | A310-02 | A310-05 |
| StarScript II RT Mix | 20 μl | 50 μl |
| 2×Reaction mix | 200 μl | 500 μl |
| Oligo (dT)18 (50 μM) | 20 μl | 50 μl |
| Random Primer (50 μM) | 20 μl | 50 μl |
| 2×RealStar SYBR Mixture | 1 ml | 3 ml |
| DEPC-ddH2O | 1 ml | 2.5 ml |
| *ROX Reference Dye/ROX Reference Dye II | 40 μl | 120 μl |
【保存条件】
-20℃恒温保存,有效期一年
【注意事项】
1. 使用前请将各组份上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2. 尽可能减少2×RealStar SYBR Mixture在光下的曝露时间,长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。
3. 本试剂盒不能用于杂交探针法。