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GenStar 2 × PCR StarMix系列产品

名称:GenStar 2 × PCR StarMix系列产品
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2 x Taq PCR StarMix


2 x Taq PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度Taq DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方便,扩增性能强,适合大规模基因检测、快速克隆筛选、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测等。 PCR产物的3· 端附有一个突出的“ A”碱基,纯化后可直接用于T载体克隆。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途
• 常规PCR扩增
• TA克隆
特点
• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性
• 高效扩增:优化的缓冲体系发挥酶的最大效能
• 性能稳定:实测4℃六个月或室温(25℃)两周后扩增性能无显著变化
• TA克隆:产物带3′突出A碱基,可直接进行TA克隆实验

产品组分

2×Taq PCR StarMix
1 ml
ddH2O
1 ml
保存条件

-20℃恒温保存两年,4℃保存六个月

质量控制

• 以λ DNA为模板,可以有效扩增8 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染
FAQ:
Q1: 2×Taq PCR StarMix可以扩增多大的片段?
A1: 实验证明,该产品可以高效扩增以基因组DNA为模板的4 kb至8 kb的片段,但对超过4 kb片段的扩增产率明显低于4 kb(含)以下片段。
Q2: 为什么含染料的PCR反应溶液可以直接上样电泳?
A2: 因为含染料PCR StarMix系列产品中已预加入指示电泳前沿的染料和协助样品沉淀的助沉剂。
Q3: 含染料PCR StarMix的产物能否用于荧光测序?
A3: 可以,但需要先进行纯化去除残留的引物、dNTP和染料。如果没有非特异性条带,可采用过柱纯化或乙醇沉淀的方法,不必切胶回收。多数测序服务公司都为测序样品提供免费纯化服务,无需客户自行纯化。
Q4: 染料对PCR有影响吗?
A4: 该染料为惰性无毒染料,对PCR的扩增效率以及保真性能均无负面影响。
Q5: GenStar PCR StarMix系列产品应该如何保存?
A5: 长期保持应置于-20℃以下恒温;如果短时间内用量大,可置于4℃保存3~6个月。
应用实例

不同品牌的2×Taq PCR PreMix扩增能力的比较。
20 μl反应体系,30个循环,取1 μl上样电泳。
M:Direct-load™ Star Marker
1:GenStar 2×Taq PCR StarMix
2:国内A公司产品
3:国外B公司产品

4:国外C公司产品


2 × Taq PCR StarMix (For PAGE)

2 × Taq PCR StarMix (For PAGE)是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度Taq DNA Polymerase、 dNTPs、 Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。使用时只需加入DNA模板和引物,并用水稀释至1×。该产品具有使用方便、灵敏度高、扩增性能强、稳定性好等优点,可最大限度地减少人为误差、节约操作时间、降低污染几率,适合大规模基因检测、快速克隆筛选、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测等。 PCR产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于T载体克隆。该产品针对聚丙烯酰胺凝胶高通量检测优化,背景更低。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程。

【用途】

• 常规PCR扩增 • PCR产物适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳
• TA克隆

【特点】

• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性 • 高效扩增:优化的缓冲体系发挥酶的最大效能
• 性能稳定:实测4 ℃三个月或室温( 25 ℃)两周后扩增性能无显著变化
• TA克隆:产物带3·突出A碱基,可直接进行TA克隆实验

【产品组分】

2×Taq PCR StarMix                  1 ml

ddH2O                                    1 ml

【保存条件】

-20℃恒温保存两年,4℃保存三个月。

【质量控制】

• 以λ DNA为模板,可以有效扩增6 kb的DNA片段 • 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染


2 × HotStart Taq PCR StarMix


2 × HotStart Taq PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度HotStart Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方便,扩增性能强,特异性好,适合大规模基因检测、多重PCR、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测。PCR产物3'端附有一个突出的“A”碱基,纯化后可直接用于T载体克隆。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途
• 常规PCR扩增,提高特异性
• Multiplex PCR• TA克隆
特点
• 高特异性:抗体型热启动,确保高效的常温抑制效果
• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性
• 性能稳定:实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化
• 提高产量:特异性的改善可直接提高目标产物的产量
• 操作方便:室温下配制反应体系,热循环仪无需预热
• TA克隆:产物带3'突出A碱基,可直接进行TA克隆实验
产品组分
2 × HotStart Taq PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
质量控制
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因,并减少非特异扩增和引物二聚体产生
• 55℃反应10分钟,抗体对Taq DNA聚合酶的活性抑制效率达95%以上
• 无内切酶、外切酶污染

2 × HotStart Power Taq PCR StarMix


本产品为预混的含有优化浓度的HotStart Power Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于热启动PCR反应。HotStart Power Taq DNA Polymerase在75℃以下温度没有活性,从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活需要95℃孵育10min。反应体系可在室温下配制,无需在冰上完成,操作方便。本产品为2 × 预混PCR反应体系,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水稀释至1×,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率,适合大规模基因检测、快速克隆筛选、半定量PCR实验和微量DNA模板的检测等。使用本品扩增的PCR产物带有3'端突出"A"碱基,可直接用于TA克隆。

【用途】

• 高灵敏度和有较强背景的基因组DNA扩增

• DNA序列测定、Multiplex PCR、RT-PCR等

【特点】

• 高特异性:化学修饰型热启动,确保高效的常温抑制效果
• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性
• 性能稳定:实测4℃三个月或室温( 25℃)一周后扩增性能无显著变化
• 提高产量:特异性的改善可直接提高目标产物的产量
• 操作方便:室温下配制反应体系,热循环仪无需预热
• TA克隆:产物带3· 突出A碱基,可直接进行TA克隆实验

【产品组分】

2 × HotStart Power Taq PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml


【保存条件】

-20℃恒温保存一年,避免反复冻融。经常使用,可置于4℃保存至少三个月。

【质量控制】

• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因,并减少非特异扩增和引物二聚体产生
• 对Taq DNA聚合酶的活性抑制效率达95%以上
• 无内切酶、外切酶污染


2 × Pfu PCR StarMix


2 × Pfu PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度Pfu DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方便,适用于对保真性要求较高的DNA片段的扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。PCR产物无3′ 端突出碱基,不可直接用于T载体克隆。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品PCR反应完成后,产物不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途
• 基因克隆、测序
• 定点突变
特点
• 高保真性:优化的预混缓冲体系确保Pfu 酶的高保真性能
• 性能稳定:实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化
产品组分
2 × Pfu PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月

质量控制
• 以基因组DNA为模板,可以有效地扩增2 kb DNA片段,荧光测序无突变碱基

• 无内切酶、外切酶污染


2 x ExPfu PCR StarMix

2 x ExPfu PCR StarMix为预混的含有优化浓度的ExPfu高保真DNA Polymerase、 dNTPs、 Mg2+、高保真反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、 SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染机率。 PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。 ExPfu高保真DNA聚合酶是一种基于Pfu改造的混合酶,具有5’→3’ DNA聚合酶活性和3’→5’外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的错配碱基。其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase 的35倍,反应速度视模板复杂程度约为2-4kb/min。对于一般性模板可以保证10kb的扩增长度。

【用途】

• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等。

【产品组分】

2 × ExPfu PCR Mix 1 ml
ddH2O 1 ml

【保存条件】

-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月

【质量控制】• 以λ DNA为模板,可以有效扩增10 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染

【注意事项】

ExPfu扩增后的PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化处理的平末端目标载体连接,也可先连接到线性平末端克隆载
体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation Kit, Cat. No. T170-01),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应
先纯化,再在PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T™ A-Tailing Kit( Cat. No. T173-01)进行。


2×HiFiTaq PCR StarMix


2×HiFiTaq PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度HiFiTaq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方便,扩增性能强,适用于对保真性要求较高的10 kb以下DNA片段的扩增。使用2×HiFiTaq PCR StarMix扩增的PCR产物部分含有3'末端突出A碱基,可直接进行TA克隆,加A处理后可提高TA克隆效率。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品PCR反应完成后,产物不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途
• 较长基因克隆、测序
• 定点突变
特点
• 高保真性:保真性是Taq 酶的3~4倍,适合保真度要求较高而Pfu 酶无法有效扩增的片段
• 高效扩增:可扩增Taq 酶无法合成的长片段DNA,对≤6 kb片段的扩增效率接近于Taq 酶
• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性,适合微量模板扩增
• 性能稳定:实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化
产品组分
2×HiFiTaq PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月
质量控制
• 以λ DNA为模板,可以有效扩增10 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增单拷贝基因
• 无内切酶、外切酶污染


2×LongTaq PCR StarMix


2×LongTaq PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度LongTaq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,对10 kb以上的超长DNA片段仍然具备较强的扩增能力,可扩增30 kb以λ DNA为模板的片段或15 kb以基因组DNA为模板的片段,故适用于构建基因图谱。PCR产物部分含有3'末端突出A碱基,可直接进行T载体克隆,加A处理后可提高TA克隆效率。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品PCR反应完成后,产物不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途

• 10 kb以上DNA片段扩增

特点

• 超长片段扩增:基因组模板可扩增10 kb以上长片段;λDNA模板可扩增35 kb片段• 较高保真性:不含DMSO、甘油等增强剂,最大限度地保持保真性

• 性能稳定:实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化

产品组分

2×LongTaq PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml

保存条件

-20℃恒温保存一年,4℃保存至少三个月

质量控制

• 以10 pg λDNA为模板,可高效扩增30 kb的DNA片段

• 无内切酶、外切酶污染


2×High-GC PCR StarMix


2×High-GC PCR StarMix是预混的含有优化浓度的GenStar高纯度HiFiTaq DNA聚合酶,高GC反应缓冲液,dNTPs,Mg2+和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方便,扩增性能强,适用于针对复杂结构模板(如高GC含量和二级结构),扩增保真性要求较高的DNA片段。扩增的PCR产物部分含有3'末端突出A碱基,可直接进行T载体克隆,加A处理后可提高TA克隆效率。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品PCR反应完成后,产物不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

用途
• 高GC含量、复杂模板的PCR扩增
特点
• 高效扩增高GC含量片段:优化的缓冲体系可协助高GC模板解链,发挥聚合酶的最大扩增效力
• 高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性
• 性能稳定,实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化
产品组分
2×High-GC PCR StarMix 1 ml
ddH2O 1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年, 4℃保存至少三个月

质量控制
• 以基因组DNA为模板,可以有效地扩增GC含量为75%的DNA片段

• 无内切酶、外切酶污染


2 × SuperStar PCR Mix


本产品为预混的含有优化浓度的SuperStar超保真DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、高保真反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。

SuperStar超保真DNA聚合酶是一种混合酶,具有5'到3'DNA 聚合酶活性和3'到5'的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的48倍、Pfu DNA Polymerase的6倍。该酶还具有快速的DNA合成速度,其合成速度约相当于普通Taq DNA Polymerase的4倍、Pfu DNA Polymerase的8倍。

本产品有含染料(红色)和不含染料(无色)两种选择。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA片段相近。

【用途】

• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等。

• 高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增

【特点】

• 高保真性:保真性是Taq的48倍, Pfu的6倍
• 高效扩增:可扩增20 kb的长片段
• 批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测

【产品组分】

2 × SuperStar PCR Mix                 1 ml

ddH2O                                        1 ml

2 × SuperStar PCR Mix含有3.0 mM MgCl2, MgCl2在反应体系中的终浓度为1.5 mM。

【保存条件】

-20℃恒温保存一年,小量分装,避免反复冻融

【活性定义】

活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74oC、 30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定
义为1个活性单位( U)。

【质量控制】

• 以λ DNA为模板,可以有效扩增20 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增15 kb的基因
• 无内切酶、外切酶污染


2 × High-GC SuperStar PCR Mix

本产品为预混的含有优化浓度的SuperStar超保真DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、高GC反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的复杂DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。PCR产物无3′端突出碱基,不可直接用于TA克隆。

SuperStar超保真DNA聚合酶是一种混合酶,具有5′→3′DNA 聚合酶活性和5′→3′的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在高GC缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的23倍、Pfu DNA Polymerase的3倍。该酶还具有快速的DNA合成速度,其合成速度约相当于普通Taq DNA Polymerase的4倍、Pfu DNA Polymerase的8倍。

本产品有含染料(红色)和不含染料(无色)两种选择。使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA片段相近。

【用途】

• 高保真扩增,长片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变等
• 高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增

【特点】

 • 高保真性:保真性是Taq的23倍, Pfu的3倍
• 高效扩增:可扩增20 kb的长片段
• 批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测

【产品组分】

2×High-GC SuperStar PCR Mix 1 ml
ddH2O 1 ml
100% DMSO 60μl

2×High-GC SuperStar PCR Mix含有3.0 mMMgCl2, MgCl2在反应体系中的终浓度为1.5 mM。

【保存条件】

-20℃恒温保存一年,小量分装,避免反复冻融

【活性定义】

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74oC、 30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定
义为1个活性单位( U)。

【质量控制】

• 以λ DNA为模板,可以有效扩增20 kb的DNA片段
• 以基因组DNA为模板,可以有效扩增15 kb的基因
• 无内切酶、外切酶污染